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目的:探究人类精子相关抗原5(sperm-associated antigen 5,SPAG5)对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响及分子机制.方法:采用qRT-PCR和Western blot筛选相应SPAG5高表达细胞株和低表达细胞株;分别设计并构建重组SPAG5敲减/过表达质粒(siRNA-SPAG5/OE-SPAG5),通过慢病毒表达质粒系统,制备敲减/过表达SPAG5的稳定细胞株;采用CCK-8增殖实验和裸鼠成瘤实验,检测乳腺癌细胞增殖能力的变化;采用细胞划痕实验、Transwell细胞实验检测乳腺癌细胞迁移、侵袭能力的变化;采用qRT-PCR和Western blot检测JAK2/STAT3通路和下游蛋白的变化;采用WP1066抑制JAK2/STAT3通路,检测细胞增殖和侵袭能力的变化.结果:相较于各自对照组,SPAG5敲减的si1-MDA-MB-231组细胞SPAG5 mRNA和蛋白水平显著降低,SPAG5过表达的OE-MCF-12A组细胞SPAG5 mRNA和蛋白水平显著升高(P＜ 0.05);同时,si1-MDA-MB-231组细胞的增殖、迁移、侵袭能力受到抑制,OE-MCF-12A组细胞得到增强(P＜0.05);si 1-MDA-MB-231组细胞的JAK2/STAT3通路磷酸化水平和下游蛋白表达受抑制(P＜0.05),OE-MCF-12A组细胞的JAK2/STAT3通路磷酸化水平和下游蛋白表达水平提高(P＜0.05);抑制JAK2/STAT3通路后SPAG5对乳腺癌细胞增殖和侵袭的促进作用消失(P＜0.05).结论:SPAG5通过JAK2/STAT3信号通路增强乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力.