生存素反义寡核苷酸诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

来源 :中华消化杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kangliwonuer
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目的生存素(survivin)是近年来发现的凋亡抑制蛋白家族新成员,在多数恶性肿瘤组织中丰富表达.因此,观察生存素反义寡核苷酸转染对肝癌细胞凋亡、增殖、细胞对化疗药物敏感性的影响.方法设计合成特异性靶向生存素的反义寡核苷酸(ASODN).肝癌细胞株hepG2分为6组:空白对照组、脂质体转染对照组、正义链转染对照组、200、400和600 nmol/L ASODN转染组.作用20 h后收获各组细胞.倒置显微镜观察细胞形态变化,Western blot法检测各组细胞生存素表达情况,流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡指数,MTT法检测5-氟尿嘧啶(5-FU)和顺铂(DDP)对各组细胞的生长抑制率.结果各ASODN转染组细胞生存素表达有不同程度减弱,细胞变圆、折光增强、漂浮、细胞碎片形成等,而各对照组细胞生长良好;各ASODN转染组细胞凋亡指数明显高于各对照组(P<0.05),以600 nmol/L转染组最为明显(P<0.05),而各对照组间差异无显著性(P>0.05);各ASODN转染组细胞增殖指数明显低于各对照组(P<0.05),以600 nmol/L转染组最为明显(P<0.05),而各对照组间差异无显著性(P>0.05);等浓度化疗药物5-FU和DDP对各ASODN转染组细胞的抑制率明显高于各对照组(P<0.05),以600 nmol/L转染组最为明显(P<0.05),而各对照组间差异无显著性(P>0.05).结论不同浓度生存素 ASODN转染能下调生存素蛋白表达,诱导肝癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性.

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