【摘 要】
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目的:探索组蛋白H3K27me3甲基转移酶EZH2在人脂肪瘤、高分化脂肪肉瘤和去分化脂肪肉瘤的表达情况及EZH2酶活性小分子抑制剂GSK126对人脂肪肉瘤细胞系SW872的影响,并初步探索
【机 构】
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西安医学院临床医学院 陕西西安710021;空军军医大学第一附属医院病理科 陕西西安710032;西安医学院医学技术学院 陕西西安710021;西安医学院中尼友好拉吉姆实验室 陕西西安710021
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目的:探索组蛋白H3K27me3甲基转移酶EZH2在人脂肪瘤、高分化脂肪肉瘤和去分化脂肪肉瘤的表达情况及EZH2酶活性小分子抑制剂GSK126对人脂肪肉瘤细胞系SW872的影响,并初步探索其可能机制.方法:筛选脂肪瘤、高分化脂肪肉瘤和去分化脂肪肉瘤患者术后活检标本共计23例,其中脂肪瘤7例,高分化脂肪肉瘤9例,去分化脂肪肉瘤7例,制成组织芯片,免疫组化染色检测EZH2的蛋白表达情况.体外培养SW872脂肪肉瘤细胞系,采用CCK-8法检测不同浓度GSK126对细胞生存的抑制作用,流式细胞技术检测细胞凋亡情况,Realtime PCR法检测细胞的凋亡与抗凋亡(Caspase-1、Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9、Bcl-2、Bag-3)、血管生成(VEGF-α)、干性(CD133、CD44、CD24)相关基因的表达,Western blot检测内质网应激相关蛋白Bip和ATF4蛋白的表达量.结果:EZH2在去分化脂肪肉瘤的表达高于高分化脂肪肉瘤,在良性脂肪瘤中的阳性表达少见(均P＜0.05).EZH2酶活性抑制剂GSK126对SW872细胞的存活有明显的抑制作用,给药后细胞凋亡率增加(P＜0.05),凋亡相关基因Caspase-1、Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9均表达增强(均P＜0.05),血管生成基因VEGF-α表达降低(P＜0.01),干性基因CD133表达降低(P＜0.01),其余基因表达无明显差别.GSK126组的内质网应激相关蛋白Bip和ATF4蛋白的表达增加.结论:EZH2蛋白表达量与脂肪肉瘤细胞分化程度呈负相关,EZH2有望成为脂肪肉瘤的生物学标志物及恶性程度标志物.EZH2抑制剂可能成为脂肪肉瘤潜在的化疗药物,可能通过增强内质网应激发挥作用.
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