蛛丝蛋白/聚己内酯/壳聚糖复合纳米纤维支架与内皮细胞的相容性

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将RGD-重组蛛丝蛋白(pNSR32)、聚己内酯(PCL)和壳聚糖(CS)共混,应用静电纺丝技术制备复合纳米纤维支架(pNSR32/PCL/CS),进行细胞相容性的初步研究。选择体外细胞培养法,以内皮细胞为种子细胞,应用MTT比色法评价材料浸提液细胞毒性及材料对内皮细胞粘附、生长及增殖的影响,细胞免疫荧光法检测与支架复合培养的细胞表型表达。结果表明,支架对内皮细胞形态无明显影响,MTT细胞毒性试验显示细胞增殖率大于100%,毒级为0级,材料对细胞无明显毒性。粘附增殖试验结果显示pNSR32/PCL/CS的细胞粘附率大于100%,粘附以及增殖状况与阳性对照组(载玻片)相比差异显著(P<0.05),该材料能够很好地支持内皮细胞粘附、增殖。添加pNSR32的材料细胞增殖活力明显优于未添加pNSR32的材料(P<0.05),添加CS的材料3、5、7 d细胞增殖活力优于未添加CS的材料(P<0.05)。细胞免疫荧光结果表明,与pNSR32/PCL/CS支架复合培养的内皮细胞vWF、CD31因子呈阳性表达,表型特征保持良好。添加pNSR32及CS能够促进内皮细胞在材料表面的增殖作用。pNSR32/PCL/CS复合纳米纤维支架细胞相容性良好,适合内皮细胞粘附生长,有望成为一种新型的组织工程小直径血管支架。
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