【摘 要】
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目的分离培养裸鼹鼠皮肤成纤维细胞并对其进行鉴定,探讨裸鼹鼠皮肤成纤维细胞是否具有分泌外泌体的能力。方法无菌取新生裸鼹鼠背部皮肤,剪碎成1~2 mm2大小,将组织块平铺于细
【机 构】
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海军军医大学基础医学院实验动物学教研室,军事科学院军事医学研究院实验动物中心
【基金项目】
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全军实验动物专项(SYDW[2018]16),国家青年自然科学基金(31702075)
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目的分离培养裸鼹鼠皮肤成纤维细胞并对其进行鉴定,探讨裸鼹鼠皮肤成纤维细胞是否具有分泌外泌体的能力。方法无菌取新生裸鼹鼠背部皮肤,剪碎成1~2 mm2大小,将组织块平铺于细胞培养皿中,待贴壁后以低糖DMEM(含20%胎牛血清)培养液进行培养,胰酶消化法对传代培养细胞进行纯化;通过细胞免疫荧光、蛋白质印迹法检测波形蛋白表达情况,对成纤维细胞进行鉴定;待细胞生长至融合度约80%时,改换低糖DMEM(含20%去除外泌体的胎牛血清)培养48 h后收集上清液,超高速离心法分离外泌体,透射电镜观察形态,纳米流式分析颗粒
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