内皮前体细胞与口腔鳞癌细胞自发性融合的实验研究

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目的:探讨骨髓源间充质干细胞之外的其它骨髓来源的细胞是否能够与口腔鳞癌细胞发生自发性融合。方法:5ml外周血经密度梯度离心和EGM-2MV培养基进行诱导培养内皮前体细胞。PKH26标记的内皮前体细胞(EPCs)与CFSE标记的口腔鳞癌细胞系Cal 27,SCC 4及SCC 9共培养,24h后双阳性且具有多个核的细胞为融合细胞。细胞流式分析检测内皮前体细胞与三种鳞癌细胞系的融合率。免疫荧光双染检测具有上皮标记物(Cytokeratin)及间质细胞标记物(Vimentin)的双阳性细胞。结果:单个核细胞诱导培养8~12天可见内皮样克隆形成;共培养24h能够检测到具有多个核PKH26/CFSE双阳性细胞;细胞流式分析显示内皮前体细胞与不同口腔鳞癌细胞的融合率分别为0.62±0.028,0.59±0.057,0.65±0.099。统计学分析表明融合率之间无显著统计学差异(P=0.706).荧光双染显示共培养体系中存在共表达Cytokeratin/Vimentin的双阳性细胞。结论:内皮前体细胞能够与口腔鳞癌细胞发生自发性融合且融合细胞共表达Cytokeratin/Vimentin,可为从细胞融合角度解释EMT转化及肿瘤侵袭提供基础研究依据。
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