正交试验优化黄连ISSR反应体系的研究

来源 :重庆中草药研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mldn2006
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目的:优化黄连(味连,Coptis chinensis Franch.)ISSR反应体系。方法:利用正交试验设计,从Mg2+、dNTP、引物、BSA4种因素3个水平进行优化。结果:确立了适合黄连ISSR分析的反应体系,即在25μL反应体系中,内含1×PCR buffer、1.5mmol/L Mg2+、200μmol/L dNTP、0.4μmol/L引物、40ng模板、1U TaqDNA聚合酶。结论:利用此优化反应体系能得到清晰、稳定的图谱。 Objective: To optimize the ISSR reaction system of Coptis chinensis (Coptis chinensis Franch.). Methods: Orthogonal experimental design was used to optimize the three factors of Mg2+, dNTP, primers and BSA. RESULTS: A reaction system suitable for ISSR analysis of Coptis chinensis was established, which contained 1×PCR buffer, 1.5 mmol/L Mg2+, 200 μmol/L dNTP, 0.4 μmol/L primer, 40 ng template, and 1 U Taq DNA polymerase in a 25 μL reaction system. . Conclusion: A clear and stable map can be obtained using this optimized reaction system.
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