【摘 要】
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为建立和优化三七 ＩＳＳＲＰＣＲ反应体系，运用正交试验和单因子试验分析模板 ＤＮＡ，ＴａｑＤＮＡ聚合酶、引物、Ｍｇ２＋和 ｄＮＴＰｓ５个因子对 ＩＳＳＲＰＣＲ反应影响。结果发现，三七 ＩＳＳＲＰＣＲ２５μＬ反应体系中５个因子最佳水平：ＤＮＡ模板为 ９６ｎｇ，ＴａｑＤＮＡ聚合酶为 ２０ｕ，Ｐｒｉｍｅｒ
【机 构】
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西南林业大学,西南林业大学园林学院
【基金项目】
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云南省应用基础研究项目(2010ZC089);云南省省部级重点学科、省高校重点实验室及校实验室共享平台资助项目;云南省教育厅科学研究基金(09C0185);国家林业局西南地区生物多样性保育重点实验室开放基金(BC2010F04);西南林业大学校基金(200611M)
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为建立和优化三七 ＩＳＳＲＰＣＲ反应体系，运用正交试验和单因子试验分析模板 ＤＮＡ，ＴａｑＤＮＡ聚合酶、引物、Ｍｇ２＋和 ｄＮＴＰｓ５个因子对 ＩＳＳＲＰＣＲ反应影响。结果发现，三七 ＩＳＳＲＰＣＲ２５μＬ反应体系中５个因子最佳水平：ＤＮＡ模板为 ９６ｎｇ，ＴａｑＤＮＡ聚合酶为 ２０ｕ，Ｐｒｉｍｅｒ浓度为 １０ｍｍｏｌ／Ｌ，ｄＮＴＰｓ浓度为 ０６８ｍｍｏｌ／Ｌ，Ｍｇ２＋浓度为 ２８ｍｍｏｌ／Ｌ。研究结果为利用 ＩＳＳＲ分子标记技术研究三七提供了理论支持。
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