A组轮状病毒SA11VP6基因的克隆和表达

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【摘要】

：

从ＳＡ１１ＶＰ６基因全序列克隆开始，设计一对两端带有酶切位点的引物，逆转录ＰＣＲ扩增出ＶＰ６全基因ＣＤＮＡ。经酶切后插入ＰＵＣ１９，构建了ＶＰ６全基因克隆ＰＲＡ６。再经酶切后插入痘苗病毒载休质凿ＰＪＳＡ１１７５中。利用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ导入ＴＫ１４３细胞，利用ＴＫ基因和Ｌａｃ基因

【作者】

：

晋圣瑾方肇寅

【机构】

：

中国预防医学科学院病毒学研究所

【出处】

：

病毒学报

【发表日期】

：

1995年2期

【关键词】

：

轮状病毒SA11 内壳蛋白基因克隆基因表达 Rotavirus strain SA11 Inner capsid protein VP6 Cloning a

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从ＳＡ１１ＶＰ６基因全序列克隆开始，设计一对两端带有酶切位点的引物，逆转录ＰＣＲ扩增出ＶＰ６全基因ＣＤＮＡ。经酶切后插入ＰＵＣ１９，构建了ＶＰ６全基因克隆ＰＲＡ６。再经酶切后插入痘苗病毒载休质凿ＰＪＳＡ１１７５中。利用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ导入ＴＫ１４３细胞，利用ＴＫ基因和Ｌａｃ基因作为重组病毒的筛选标记。表达产物用单克隆抗体ＥＬＩＳＡ法检测，发现细胞培养上清和细胞裂解液都是阳性。Ｗｅｓｔｅｒｎｂ

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