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目的探讨4周龄大鼠海马脑片培养方法。方法体外微孔膜插件培养海马脑片,应用倒置相差显微镜、乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒、免疫荧光组织化学法及共聚焦激光扫描显微镜观察培养情况。结果培养海马脑片逐渐变薄,细胞条带亮度逐渐减弱;培养12d内,培养液中LDH含量稳定,海马脑片存活良好;在培养过程中,神经细胞逐渐减少,星形胶质细胞逐渐增多。结论本实验建立的4周龄大鼠器官型海马脑片培养模型可为体外研究神经系统相关疾病提供一种实验方法。