【摘 要】
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本研究采用爪蟾卵母细胞抽提物处理和牛胎儿成纤维细胞（JBCFF）,并以发生重编程的细胞为核供体进行体细胞核移植,研究其对克隆效率的影响。分别超排3只爪蟾,收集卵母细胞后提取
【基金项目】
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国家科技支撑项目（2012BAD12B01-2）, 基本科研业务费重点项目（2013ywf-zd-2）, 家畜胚胎工程与繁殖创新团队（ASTIP-IAS06-2015）
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本研究采用爪蟾卵母细胞抽提物处理和牛胎儿成纤维细胞（JBCFF）,并以发生重编程的细胞为核供体进行体细胞核移植,研究其对克隆效率的影响。分别超排3只爪蟾,收集卵母细胞后提取其抽提物,用BCA蛋白浓度测定试剂盒确定其蛋白含量,SDS-PAGE分析其中所含蛋白的种类。应用细胞膜透化剂Digitonin对建立的JBCFF进行通透处理和PI染色,筛选最适浓度;并用获得的抽提物处理牛体细胞,获得重编程细胞。以发生重编程的体细胞为供体进行核移植,同时比较离子霉素＋6-DMAP和A23187＋6-DMAP两种组合激活后
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