【摘 要】
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目的:探讨冬凌草甲素(oridonin,ORI)对淋巴细胞白血病Nal m-6细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法:以不同浓度的ORI(0～48μmol/L)作用于体外培养的Nal m-6细胞0、24、48及72
【机 构】
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中山大学附属三院血液内科,中山大学附属三院肝移植中心,
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目的:探讨冬凌草甲素(oridonin,ORI)对淋巴细胞白血病Nal m-6细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法:以不同浓度的ORI(0～48μmol/L)作用于体外培养的Nal m-6细胞0、24、48及72 h,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡时的DNA梯状条带,应用透射电镜观察细胞形态学的变化,用蛋白质印迹法检测Caspase-3及其裂解底物多聚(ADP-核糖)聚合酶PARP[(poly(ADP-ribose)polymerase)]表达水平的变化,并对凋亡调节蛋白Bax及Bcl-2的表达水平进行检测。结果:>16μmol/L的ORI可显著抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量-效与时-效关系,药物作用48 h后在琼脂糖凝胶电泳上可见明显的DNA梯状条带。蛋白质印迹法检测结果表明,Caspase-3被活化出现相对分子质量20×103的亚单位,同时PARP被裂解出现相对分子质量89×103的亚单位片段。同时,药物作用48 h后凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达水平明显降低,而促凋亡蛋白Bax的表达水平显著升高。结论:ORI能显著抑制Nal m-6细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,通过激活Caspase-3以及降低Bcl-2、升高Bax的表达水平是ORI诱导细胞发生凋亡的重要作用机制;这些结果表明ORI是一种潜在的抗白血病药物。
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