杜氏利什曼原虫四川分离株无鞭毛像蛋白基因的克隆及真核表达

来源 :中国寄生虫学与寄生虫病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenxiuyang521
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目的 克隆、真核表达杜氏利什曼原虫四川株的无鞭毛体蛋白(amastin)编码基因.方法 PCR扩增杜氏利什曼原虫四川汶川人株L.d.SC10H2与四川南坪犬株L.d.SC7的无鞭毛体蛋白基因,将该基因导入poDNA3.1(+),构建真核表达重组质粒,转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法鉴定重组质粒的瞬时表达;RT-PCR和Western blotting鉴定稳定表达.结果 2株杜氏利什曼原虫均扩增出552 bp的无鞭毛体蛋白基因,同源性为86%.转染后在NIH3T3细胞膜和细胞内观察到较强的绿色荧光,表明
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