【摘 要】
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目的建立一种快速检测人类谷胱甘肽S转移酶(GST)基因多态性的方法并初步应用。方法反应体系中加入新型荧光染料SYBR greenⅠ,应用多重PCR同时扩增GSTM1基因及内参照CYP1A1基
【机 构】
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南通大学附属医院基因诊断实验室,南通大学附属医院酶学研究室
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目的建立一种快速检测人类谷胱甘肽S转移酶(GST)基因多态性的方法并初步应用。方法反应体系中加入新型荧光染料SYBR greenⅠ,应用多重PCR同时扩增GSTM1基因及内参照CYP1A1基因。PCR反应结束后,以0.1℃/s的速度从65℃到95℃检测并记录反应管荧光的变化,根据得到的熔解曲线分析GSTM1基因型。结果GSTM1基因携带型(GSTM1+)熔解曲线出现两个峰带,GSTM1基因空白型(GSTM1-)只出现一个峰带,两峰峰尖所对应的温度值与预期值相同,琼脂糖凝胶电泳显示PCR产物分子量与预期分子量一致。DNA抽提后整个检测在L ightCyc ler扩增仪上1 h内完成。结论SYBR greenⅠ结合熔解曲线分析是一种简单、快速、准确的分析GSTM1基因多态性的方法。
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