【摘 要】
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目的 研制丙型肝炎病毒(HCV)基因分型的寡核苷酸探针芯片,并用此方法对76例HCV RNA阳性的肝炎患者进行检测.方法根据HCV 5′-非编码区和核心抗原区序列设计棸合酶链反应(PCR)引物和寡核苷酸探针,探针经一定修饰后固定到尼龙膜上,即成为HCV基因芯片.采用PCR参入法标记地高辛分子,其中6份标本PCR产物同时进行测序分析.结果此芯片可分析HCV 11个基因型的15种亚型.76例HCV肝炎
【机 构】
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300170,天津市第三中心医院,天津南开大学生命科学学院,天津南开大学生命科学学院,天津南开大学生命科学学院,300170,天津市第三中心医院,300170,天津市第三中心医院,300170,天津市
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目的 研制丙型肝炎病毒(HCV)基因分型的寡核苷酸探针芯片,并用此方法对76例HCV RNA阳性的肝炎患者进行检测.方法根据HCV 5′-非编码区和核心抗原区序列设计棸合酶链反应(PCR)引物和寡核苷酸探针,探针经一定修饰后固定到尼龙膜上,即成为HCV基因芯片.采用PCR参入法标记地高辛分子,其中6份标本PCR产物同时进行测序分析.结果此芯片可分析HCV 11个基因型的15种亚型.76例HCV肝炎患者芯片杂交结果均阳性,而20名健康对照血清均阴性.76例患者阳性标本的分型结果:1b型64例,2a型11例,3a型1例,未见混合型感染.6份标本的序列分析表明,芯片杂交和测序的分型结果完全一致.结论此芯片可初步用于检测血清HCV RNA,并对HCV基因(亚)型进行准确分析。
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