下调Cullin1基因表达抑制乳腺癌细胞增殖研究

来源 :中华实验外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuan1911
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目的 探讨下调Cullin1(Cul1)基因对乳腺癌细胞增殖的影响及其机制.方法 利用脂质体将靶向Cul1基因小干扰RNA(siRNA)、对照siRNA分别转染人乳腺癌MDA-MB-231和BT-549细胞,Western blot技术检测Cul1基因表达,细胞计数试剂盒(CCK-8)比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期变化,Western blot检测细胞周期蛋白(Cyclin)A、Cyclin D1、Cyclin E以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21和p27表达.结果 与对照组比较,转染Cull siRNA 48 h后MDA-MB-231和BT-549细胞Cul1蛋白表达明显降低;细胞增殖明显减慢,72 h和96 h更加明显(P<0.01);Cul1基因干涉6h后2种细胞G1期细胞比例[(29.49±0.75)%、(24.86%±0.52)%]增加,与对照组[(17.39±0.56)%、(12.73%±0.41)%]比较差异有统计学意义(P<0.01).Cul1基因干涉后2种细胞Cyclin A、Cyclin D1及Cyclin E表达明显减少,而p21和p27表达明显增加,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 Cul1基因干涉后能通过影响细胞周期蛋白及其依赖性激酶抑制因子的表达,使乳腺癌细胞停滞在G1期,最终抑制其增殖。

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