肝细胞核因子4α增强型1.0倍HBV复制子体外复制模型建立及初步应用

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目的建立一种肝细胞核因子4α(HNF4α)增强型1.0倍HBV复制子体外复制模型。方法从临床获得的急性乙型肝炎患者血清中扩增并克隆HBV全长DNA;手术获得肝组织中提取总RNA,扩增并克隆HNF4α基因cDNA。BspQI/ScaI双酶切回收HBV全长DNA,HNF4α基因cDNA定向连接到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建pcDNA3.1-4α表达载体。将HBV全长DNA1μg/孔,按比例共转染pcDNA3.1-4α(0,0.5μg,1μg)于HepG2细胞,96 h后检测细胞上清中的HBsAg
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