不同亚型Akt/P13K在肿瘤细胞凋亡中的作用

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目的研究磷酸酰肌醇-3-激酶(P13K)通过不同亚型的Akt调节细胞凋亡。方法各种肿瘤细胞种植在96孔或6孔细胞培养皿中,采用免疫沉淀加酶联法测定Akt磷酸化状态及其酶活性。通过免疫沉淀加Werstern印迹法,测定Akt活性。用细胞凋亡实验定量分析Akt抑制剂诱导细胞死亡的效应。结果①各类Akt亚型抑制剂可阻断Akt,或Akt2蛋白序列上的第308位点苏氨酸(pAkt^308)和第473位点丝氨酸(pAkt^473)磷酸化,并表现出相应的Akt亚型抑制特异性;②抑制磷酸化Akt可明显降低其激活底物GSK
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