【摘 要】
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目的:观察马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)致大鼠肝脏损伤的情况,并探讨其对自噬相关因素的影响.方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组、自噬抑制剂组、AAⅠ低剂量(20mg/kg)组、AAⅠ高剂量(40 ng/kg)组、自噬抑制剂+AAⅠ低剂量组、自噬抑制剂+AA Ⅰ高剂量组,每组5只.自噬抑制剂干预组大鼠预先腹腔注射3-甲基腺嘌呤(3-MA,20 mg/kg);抑制剂干预1h后,从Ⅰ干预组腹腔注射给予相应剂量的AA Ⅰ.药物干预连续9d.末次给药后,取血、分离肝脏.生化分化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬
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目的:观察马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)致大鼠肝脏损伤的情况,并探讨其对自噬相关因素的影响.方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常组、自噬抑制剂组、AAⅠ低剂量(20mg/kg)组、AAⅠ高剂量(40 ng/kg)组、自噬抑制剂+AAⅠ低剂量组、自噬抑制剂+AA Ⅰ高剂量组,每组5只.自噬抑制剂干预组大鼠预先腹腔注射3-甲基腺嘌呤(3-MA,20 mg/kg);抑制剂干预1h后,从Ⅰ干预组腹腔注射给予相应剂量的AA Ⅰ.药物干预连续9d.末次给药后,取血、分离肝脏.生化分化仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,并计算比值;光镜和透射电镜下观察肝组织形态学变化.PCR检测肝组织Beclin1、LC3、p53的mRNA表达水平;免疫组化检测Beelin 1、LC3、p53的蛋白表达水平.结果:①与正常组相比,AAⅠ低剂量组大鼠血清AST水平显著升高(P＜0.05),AAⅠ高、低剂量组AST/ALT比值明显升高(P＜0.05,P＜0.01);与自噬抑制剂组相比,自噬抑制剂+从Ⅰ高剂量组与自噬抑制剂+AAⅠ低剂量组AST/ALT比值均明显升高(P＜0.01).②HE染色观察显示,AA Ⅰ高、低剂量组可见肝细胞肿胀,且AAⅠ高剂量组的损伤程度更为显著;自噬抑制剂+AAⅠ高剂量组出现肝细胞出血性坏死,损伤程度较AA Ⅰ高剂量组明显加重.透射电镜观察显示,AAⅠ高、低剂量组线粒体肿胀,AAⅠ高剂量组亦出现脂肪变性;自噬抑制剂+AAⅠ低剂量组线粒体肿胀;自噬抑制剂+AAⅠ高剂量组可见内质网肿胀,隐见自噬小体.③与正常组相比,AAⅠ高、低剂量组53 mRNA表达量显著上调(P＜0.05);与自噬抑制剂组相比,自噬抑制剂+AAⅠ低剂量组LC3 mRNA表达量明显下调(P＜0.05),自噬抑制剂+AA Ⅰ高剂量组Beclin 1和LC3的mRNA表达量显著降低(P＜0.01);自噬抑制剂+AA Ⅰ高剂量组Beclin1、LC3、p53的mRNA表达量明显低于自噬抑制剂+AA Ⅰ低剂量组(P＜0.05,P＜0.01).④与正常组相比,AA Ⅰ高、低剂量组Beclin 1、LC3、p53蛋白表达均明显上调(P＜0.01),且从Ⅰ高剂量组3种蛋白表达明显高于从Ⅰ低剂量组(P＜0.05,P＜0.01);与自噬抑制剂组相比,自噬抑制剂与不同剂量AAⅠ协同作用后3种蛋白表达均明显上调(P＜0.01);与自噬抑制剂+AAⅠ低剂量组相比,自噬抑制剂+AA Ⅰ高剂量组Beclin 1、LC3蛋白表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01),p53蛋白表达明显升高(P＜0.01).结论:从Ⅰ能够诱导大鼠肝脏损伤,且自噬因素可促进AA Ⅰ肝损伤,其作用机制可能与调节p53蛋白表达、诱导自噬相关.
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