腺病毒载体转染在体血管的特性

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目的观察腺病毒载体转染大鼠颈动脉的特性即基因转染的有效性和外源性基因表达的时间过程以及探讨局部血管转基因对全身各脏器的影响。方法用可溶性支架行大鼠颈动脉吻合,使Adv5-CMV质粒(对照组)或Adv5-CMV/LacZ质粒(治疗组)转染大鼠颈动脉,转染时间(置入支架至恢复血流)为30分钟。术后2、7、14、28、60及90天取吻合的颈动脉,术后7、14天取治疗组升主动脉、心、脑、肝、肺、脾、肾,行β-半乳糖苷酶(LacZ基因的表达产物)活性测定和组织化学染色。结果(1)β-半乳糖苷酶活性测定:对照组术后2、7、14、28、60、90天所有吻合颈动脉均无β-半乳糖苷酶活性;治疗组术后第2天即有β-半乳糖苷酶基因的表达,7∽14天为基因表达的高峰期,28天后基因表达量明显减少,但低水平的基因表达可持续3个月之久。治疗组术后7、14天所取升主动脉、心、脑、肝、肺、脾及肾组织均无β-半乳糖苷酶活性。(2)β-半乳糖苷酶组织化学染色结果:治疗组术后2、7、14、28、60、90天每条吻合颈动脉均可见蓝染,其中术后7、14天每条颈动脉的横切面的全周均有蓝染,血管壁内层、中层的大部分细胞被染成蓝色。治疗组术后7、14天所取升主动脉、心、脑、肝、肺、脾及肾组织均无蓝染,对照组所有吻合颈动脉亦未见蓝染。结论(1)腺病毒载体能高效转染大鼠在体颈动脉;(2)腺病毒载体转染大鼠颈动脉后,第2天即有外源性基因的表达,7-14天为基因表达的高峰期,28天后表达量明显减少,但低水平的基因表达可持续至3个月后;(3)腺病毒载体用于在体血管转基因具有良好的安全性。
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