葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的表达抑制对A431细胞增殖和细胞周期的影响

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目的

研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)表达下调对皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞增殖和细胞周期的影响。

方法

正常培养人永生化上皮细胞HaCaT、皮肤鳞癌SCL-1和A431细胞,采用Western印迹法检测细胞中G6PD蛋白的表达。当A431细胞生长至85% ~ 90%融合时,将siRNA对照(siRNA对照组)和G6PD siRNA(G6PD siRNA组)分别转染A431细胞,未转染的A431细胞则为未转染组。Western印迹法检测3组不同处理的A431细胞中G6PD蛋白及细胞周期蛋白D1、CDK4的表达,CCK-8法检测3组A431细胞的增殖情况,流式细胞仪分析3组A431细胞周期的变化。

结果

正常培养的2株皮肤鳞癌SCL-1和A431细胞中G6PD蛋白的表达水平(分别为0.308 ± 0.023和0.643 ± 0.046)均显著高于HaCaT细胞(0.100 ± 0.019),且A431细胞显著高于SCL-1细胞(均P < 0.05)。A431细胞G6PD siRNA组G6PD、细胞周期蛋白D1和CDK4蛋白的表达(0.134 ± 0.027、0.154 ± 0.017、0.166 ± 0.017)显著低于未转染组(0.425 ± 0.029、0.344 ± 0.024、0.330 ± 0.020)和siRNA对照组(0.444 ± 0.033、0.350 ± 0.027、0.348 ± 0.018),差异均有统计学意义(P < 0.05)。G6PD siRNA组在24 ~ 96 h各时间点的细胞增殖活性均明显低于siRNA对照组和未转染组(P < 0.001),而siRNA对照组与未转染组间细胞增殖差异无统计学意义(均P > 0.05)。G6PD siRNA组G0/G1期A431细胞比例显著高于siRNA对照组及未转染组(P < 0.001),而G6PD siRNA组S期A431细胞比例又显著低于siRNA对照组及未转染组(P < 0.001)。

结论

G6PD可能在调控皮肤鳞癌细胞增殖和细胞周期中发挥重要作用。

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