【摘 要】
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目的构建重组人胱抑素C（cystatinC，CysC）的原核高效表达质粒，诱导表达并纯化获得CysC重组蛋白。方法根据大肠埃希菌编码蛋白的特性设计CysC编码基因序列，人工合成目的基因克隆至pE
【机 构】
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广州军区广州总医院医学实验科,广东省疾病预防控制中心病原微生物检验所
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目的构建重组人胱抑素C（cystatinC，CysC）的原核高效表达质粒，诱导表达并纯化获得CysC重组蛋白。方法根据大肠埃希菌编码蛋白的特性设计CysC编码基因序列，人工合成目的基因克隆至pET-22b（＋）表达载体中，测序及酶切鉴定正确后诱导其在大肠埃希菌BL21中表达，所获得的包涵体蛋白经亲和层析纯化后采用SDS—PAGE及Western印迹鉴定。结果酶切结果证实构建的表达质粒结构正确；测序结果显示克隆的基因序列所编码的蛋白与GenBank中的CysC氨基酸序列相符；SDS-PAGE及Western
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