论文部分内容阅读
目的：构建特异性抑制甲胎蛋白（AFP）的小干扰RNA（siRNA）表达载体，为进一步研究AFP基因功能及AFP相关肿瘤的基因治疗奠定基础。方法：设计并合成AFP特异性的短链寡核苷酸，退火形成双链DNA片段，通过与RNAi-Ready pSIREN-DNR-DsRed-Express Donor Vector连接、转化大肠杆菌、扩增、纯化得到所需质粒，用琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列。结果：琼脂糖凝胶电泳证实纯化后的质粒大小约为6740bp，测序证实插入序列与合成的寡核苷酸序列完全符合