B型肉毒毒素轻链的高效制备及活性鉴定

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目的 在大肠杆菌中高效表达B型肉毒毒素轻链 (BoNT/BLC) 并纯化, 研究其生物学活性.方法: 根据报道的BoNT/BLC基因序列设计引物, 从肉毒梭菌中扩增BoNT/BLC基因片段, 将其克隆至原核表达载体pET-22b中,重组质粒转化大肠杆菌BL21 (DE3) Rosetta感受态细胞, 构建重组大肠杆菌pET-22bBoNT/BLC/BL21 (DE3) Rosetta,在20℃条件下用IPTG诱导目的蛋白表达, 表达产物经HisTrapFF柱纯化, 用SDS-PAGE对目的蛋白进行鉴定,
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