犊牛口腔黏膜上皮细胞T7噬菌体展示文库的构建

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试验旨在筛选水泡性门炎病毒的受体,构建犊牛口腔黏膜上皮细胞T7噬菌体展示文库。通过用Trizol试剂提取犊牛口腔黏膜上皮细胞总RNA,然后分离和纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRI/HindⅢ接头,然后用EcoRI和HindⅢ酶消化双链cDNA末端接头,使双链cDNA2端含有EcoRI和HindlI黏性末端。所有处理后的双链cDNA,经MiniColumn纯化,收集400bp以上的双链cDNA片段,将其连接带有EcoRI和Hindm末端的T7Select10—3b载
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