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目的 构建结核分枝杆菌esat-6基因原核表达载体，使其在大肠杆菌中表达融合重组蛋白，并纯化。方法 用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出esat-6基因片段，克隆至pMD18-T载体，PCR筛选阳性克隆并测序；用限制性内切酶消化后，目的片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-2，构建pGEX-esat-6重组质粒，将其转化入大肠杆菌JM109；PCR和双酶切鉴定转化菌落；将阳性菌株经IPTG诱导，SDS-PAGE和免疫印迹分析靶蛋白的表达；用谷胱甘肽-琼脂糖亲合层析法纯化融合蛋白。结果 PCR扩