【摘 要】
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目的:探讨石蒜碱诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的的机制.方法:裸鼠成瘤实验检测石蒜碱对体内肝癌细胞增殖能力的影响;MTT法分析石蒜碱对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用;将25、50及100 μmol/L石蒜碱作用于HepG-2细胞48 h,倒置荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞凋亡;激光共聚焦观察活性氧荧光强度;测定SOD的活性,MDA的水平;Western blot法检测细胞Raf蛋白激酶(Raf)、p-Raf、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)、p-MEK、细胞外调节蛋白激酶(ERK2)、p-ERK
【机 构】
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漯河医学高等专科学校药学系,漯河462002;漯河医学高等专科学校基础医学部,漯河462002;漯河医学高等专科学校药学系,漯河462002;河南省肿瘤发生与防治研究创新型科技团队,漯河462002;
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目的:探讨石蒜碱诱导肝癌HepG-2细胞凋亡的的机制.方法:裸鼠成瘤实验检测石蒜碱对体内肝癌细胞增殖能力的影响;MTT法分析石蒜碱对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用;将25、50及100 μmol/L石蒜碱作用于HepG-2细胞48 h,倒置荧光显微镜观察细胞形态;流式细胞仪检测细胞凋亡;激光共聚焦观察活性氧荧光强度;测定SOD的活性,MDA的水平;Western blot法检测细胞Raf蛋白激酶(Raf)、p-Raf、丝裂原活化蛋白激酶(MEK)、p-MEK、细胞外调节蛋白激酶(ERK2)、p-ERK2、半胱天冬酶3(cleaved Caspase-3)、cleaved Caspase-9蛋白表达水平.结果:裸鼠成瘤实验显示石蒜碱对肝癌HepG-2细胞裸鼠皮下移植瘤生长具有抑制作用;MTT结果显示,石蒜碱对肝癌HepG-2细胞的增长具有抑制作用;Hoechest 33342染色和流式细胞仪检测,细胞凋亡率明显增加(P＜0.05或P＜0.01);与模型对照组比较,25、50、100 μmol/L石蒜碱能增加ROS、MDA含量,降低SOD活性;上调凋亡相关蛋白 cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达,50、100 μmol/L 的石蒜碱能降低 HepG-2细胞中 p-Raf/Raf、p-MEK/MEK、p-ERK2/ERK2比值(P＜0.05或P＜0.01).结论:石蒜碱能抑制肝癌HepG-2细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能和调控Ras/raf/MEK/ERK信号通路和ROS水平有关.
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