燐光寿命法研究变性剂对大肠杆菌碱性磷酸酶构象的影响

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色氨酸残基燐光寿命监测了大肠杆菌碱性磷酸酶在不同变性剂中展开过程的构象变化.结果表明:不同变性剂加入蛋白质溶液中,色氨酸残基的微环境发生了较大的变化,燐光发射减弱,寿命缩短,预示了色氨酸残基从刚性的疏水内芯转移到蛋白质表面;通过Arrhenius关系式获得的热动力学参数如活化能(Ea)、活化熵(△S.)、活化焓(△H°)进一步证实了酶展开过程中间态的形成.
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