【摘 要】
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根据Genebank网站公布的蜜蜂球囊菌ITSl.5.8s,ITS2 rDNA保守序列(U68313)设计出一对特异性引物ASCU和ASCD,可特异性的扩增蜜蜂球囊菌ITSI,5.8srRNA,ITS2序列上大小为471 bp的
【机 构】
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吉林山入境检验检疫局,吉林大学畜牧兽医学院预防兽医学国家重点学科,吉林农业大学
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根据Genebank网站公布的蜜蜂球囊菌ITSl.5.8s,ITS2 rDNA保守序列(U68313)设计出一对特异性引物ASCU和ASCD,可特异性的扩增蜜蜂球囊菌ITSI,5.8srRNA,ITS2序列上大小为471 bp的片段.优化了PCR最佳反应条件和体系;特异性试验结果表明与蜜蜂幼虫芽孢杆菌、蜂房蜜蜂球菌、蜜蜂败血杆菌无交叉反应,具有良好的特异性.敏感性试验结果表明敏感性可达7CFU/mL的蜜蜂球囊菌.通过将定量的蜜蜂球囊菌添加到蜂蜜、花粉、蜂胶和蜂王浆等蜂产品中进行模拟检疫,结果显示所建立的PCR检测方法适用于上述蜂产品中蜜蜂球囊菌的检疫.该方法与病原菌分离培养等传统检疫方法相比较,具有快速、灵敏、特异等优点,可用于蜜蜂及蜂产品中白垩病的进出口检疫及快速诊断.
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