【摘 要】
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目的观察Annexin-A1模拟肽Ac2-26对小胶质细胞炎性介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和一氧化氮(NO)释放的影响及其对Toll样受体2(TLR2)的调控作用。方法根据处理不同将大鼠来源的原代小胶质细胞随机分为Aβ1-42组(给予Aβ1-42刺激组)、Aβ1-42＋对照乱序肽组(在给予Aβ1-42刺激的同时加入氨基酸乱序组处理)、Aβ1
【机 构】
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430014 华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院检验科,430014 华中科技大学同济医学院基础医学院神经生物学系,430014 华中科技大学同济医学院附属武汉市中心医院检验科,430014 华
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目的观察Annexin-A1模拟肽Ac2-26对小胶质细胞炎性介质肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和一氧化氮(NO)释放的影响及其对Toll样受体2(TLR2)的调控作用。
方法根据处理不同将大鼠来源的原代小胶质细胞随机分为Aβ1-42组(给予Aβ1-42刺激组)、Aβ1-42＋对照乱序肽组(在给予Aβ1-42刺激的同时加入氨基酸乱序组处理)、Aβ1-42＋Ac2-26(在给予Aβ1-42刺激的同时加入Ac2-26处理)及空白对照组。经上述处理24 h后，收集各组小胶质细胞。用CCK-8法检测细胞存活率，采用倒置相差显微镜观察细胞形态，收集各组细胞上清液采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定TNF-α、IL-1β、IL-6和NO的浓度，采用Western blot法测定TLR2的蛋白水平。
结果Aβ1-42和Ac2-26对小胶质细胞存活率没有影响，与空白对照组比较差异无统计学意义。Aβ1-42作用后，小胶质细胞形态发生明显变化，由静息的苎麻状变成激活的阿米巴状巨噬细胞样；Aβ1-42组、Aβ1-42＋对照乱序肽组、Aβ1-42＋Ac2-26及空白对照组上清TNF-α浓度分别为(125.17±7.13)ng/L、(118.78±7.28)ng/L、(24.02±2.62)ng/L和(20.89±1.82)ng/L，IL-1β浓度分别为(117.61±8.73)ng/L、(108.90±6.53)ng/L、(27.06±3.32)ng/L和(24.58±3.45)ng/L，IL-6浓度分别为(108.67±5.86)ng/L、(102.67±4.85)ng/L、(25.94±2.83)ng/L和(19.68±2.66)ng/L，Aβ1-42＋Ac2-26组上清液TNF-α、IL-1β和IL-6浓度明显低于Aβ1-42组、Aβ1-42＋对照乱序肽组(P<0.05)，与空白对照组比较差异无统计学意义。Aβ1-42＋Ac2-26组上清液NO浓度为(20.27±2.53)mmol/L，低于Aβ1-42组(75.68±6.14)mmol/L、Aβ1-42＋对照乱序肽组(69.25±4.50)mmol/L，与空白对照组(16.39±2.96)mmol/L比较差异无统计学意义。Western blot结果表明，Aβ1-42＋Ac2-26组TLR2水平明显低于Aβ1-42和Aβ1-42＋对照乱序肽组，与空白对照组比较差异无统计学意义。
结论Ac2-26可有效抑制Aβ1-42激活的小胶质细胞释放炎性介质TNF-α、IL-1β、IL-6和NO，主要通过下调TLR2的水平来实现的。Ac2-26可能作为一种新的治疗阿尔兹海默病的靶向药物。
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