【摘 要】
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目的：构建腺病毒rAd-CMV-E1A,将其作用于人鼻咽癌CNE-1细胞,验证目的基因E1A是否具有放射增敏作用及其作用机制.方法：使用“两步转化法”,完成质粒pAd-pShuttle-CMV-E1A的构建,
【机 构】
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景德镇市第一人民医院肿瘤科,福建医科大学基础医学院病原生物学系,福建医科大学第二临床医学院,福建医科大学附属第二医院放疗科,福建医科大学附属第一医院放疗科
【基金项目】
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福建省医学创新课题(编号:2015-CX-32);福建省教育厅资助项目(编号:JA11127)
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目的：构建腺病毒rAd-CMV-E1A,将其作用于人鼻咽癌CNE-1细胞,验证目的基因E1A是否具有放射增敏作用及其作用机制.方法：使用“两步转化法”,完成质粒pAd-pShuttle-CMV-E1A的构建,将其包装成腺病毒rAd-CMV-E1A;以相同的方法构建腺病毒rAd-CMV.使用噬菌斑法测定滴度.将病毒作用于CNE-1细胞,使用RT-PCR、实时荧光定量PCR检测E1A、p53、p21基因表达情况;联合X射线照射细胞,采用MTT比色法、细胞克隆形成实验、Annexin V-FITC/PI双染检测
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