【摘 要】
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酵母双杂交和单杂交技术是筛选蛋白质互作或蛋白质与DNA互作的一种高效分子生物学技术,是生物大分子互作和调控的重要的手段.为了获得高容量的蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)基因文库,为后续深入挖掘蒺藜苜蓿相关基因,改善蒺藜苜蓿品质提供基础.本研究选取了不同组织来源的蒺藜苜蓿,并对蒺藜苜蓿进行不同的激素诱导或胁迫处理,利用SMART技术成功构建高容量的蒺藜苜蓿酵母杂交cDNA文库.文库质量检测结果表明:文库滴定数为5×107 CFU/mL,文库库容量为1.28×107 CFU,平均插入片段长度
【机 构】
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北京林业大学草业与草原学院,北京,100083
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酵母双杂交和单杂交技术是筛选蛋白质互作或蛋白质与DNA互作的一种高效分子生物学技术,是生物大分子互作和调控的重要的手段.为了获得高容量的蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)基因文库,为后续深入挖掘蒺藜苜蓿相关基因,改善蒺藜苜蓿品质提供基础.本研究选取了不同组织来源的蒺藜苜蓿,并对蒺藜苜蓿进行不同的激素诱导或胁迫处理,利用SMART技术成功构建高容量的蒺藜苜蓿酵母杂交cDNA文库.文库质量检测结果表明:文库滴定数为5×107 CFU/mL,文库库容量为1.28×107 CFU,平均插入片段长度大于1000 bp,24个克隆全部能够扩增出条带,cDNA片段重组率为100％.该文库质量较高,所包含的遗传信息完整,符合酵母杂交筛选试验要求,可应用于蒺藜苜蓿基因表达调控的研究和互作蛋白的筛选试验.
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