【摘 要】
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运用酶联免疫吸附法(ELISA)和代谢组学对2种心肾不交失眠动物模型进行分析比较,以期探究出一种较为理想的动物模型,并初步探讨心肾不交失眠本质。基于临床心肾不交失眠的证候
【机 构】
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山东中医药大学药学院; 山东省中医药研究院;
【基金项目】
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山东省重大科技创新工程项目(2018CXGC1308)
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运用酶联免疫吸附法(ELISA)和代谢组学对2种心肾不交失眠动物模型进行分析比较,以期探究出一种较为理想的动物模型,并初步探讨心肾不交失眠本质。基于临床心肾不交失眠的证候特征和疾病特征,采用腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)和多因素共同作用的方法复制心肾不交失眠动物模型,采用行为学观测、酶联免疫吸附法、代谢组学从多个层次对病证结合的动物模型进行评价。Wistar大鼠随机分成正常组、PCPA组、复合模型(FH)组,记录大鼠行为学、体质量、肾上腺指数、脾脏指数;利用ELISA检测血清中促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、肾上腺皮质激素(ACTH)水平;采用UPLC-QE-MS检测血清中的差异代谢物信息。行为学测得FH组体质量、肾上腺指数较PCPA组均显著降低(P<0.05);ELISA测得FH组较PCPA组ACTH,CRH显著升高;血清样本采集的数据统计经分析鉴定出9种潜在生物标志物,心肾不交失眠主要有4条代谢通路,分别是磷酸戊糖代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,组氨酸代谢,牛磺酸和亚牛磺酸代谢。PCPA和多因素共同作用方法,均能成功复制出失眠模型,但多因素造模法与临床中医病证更为相似。采用动物行为学、酶联免疫、代谢组学能够从体外到体内、从宏观到微观、从个体到整体对心肾不交失眠大鼠模型进行综合评价。
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