【摘 要】
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目的:探究铁蛋白最佳表达条件,用于开发具有靶向药物传递功能或者高效包被疫苗、营养物质等的纳米载体.方法:该实验对人体铁蛋白和牡蛎铁蛋白基因进行合成,分别通过单质粒表达和共转表达,结合前期经验选择特定培养条件,筛选出具有活性的目标蛋白.结果:人体重链铁蛋白及轻链铁蛋白在单转表达和共转表达系统下的最佳表达条件都分别是15℃诱导16h和37℃诱导4h,共转表达效果都不如单转表达.而牡蛎铁蛋白2种系统的最佳表达条件均为37℃诱导4h,相比单转,共转的表达水平稍有下降但可溶性大幅上升,表达效果需要进一步纯化来评估.
【机 构】
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中国食品发酵工业研究院,北京市蛋白功能肽工程技术研究中心,北京100015;北京城市学院,北京100083
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目的:探究铁蛋白最佳表达条件,用于开发具有靶向药物传递功能或者高效包被疫苗、营养物质等的纳米载体.方法:该实验对人体铁蛋白和牡蛎铁蛋白基因进行合成,分别通过单质粒表达和共转表达,结合前期经验选择特定培养条件,筛选出具有活性的目标蛋白.结果:人体重链铁蛋白及轻链铁蛋白在单转表达和共转表达系统下的最佳表达条件都分别是15℃诱导16h和37℃诱导4h,共转表达效果都不如单转表达.而牡蛎铁蛋白2种系统的最佳表达条件均为37℃诱导4h,相比单转,共转的表达水平稍有下降但可溶性大幅上升,表达效果需要进一步纯化来评估.结论:对于人体重链铁蛋白及轻链铁蛋白,选择单转表达系统15℃诱导16h生产所需蛋白较好;对于牡蛎铁蛋白,选择共转表达系统37℃诱导4h生产所需蛋白较好,但具体大规模生产因培养条件、测定方法不同还需进一步考证这2种表达系统.
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