【摘 要】
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引导蛋白质功能进化常用的方法是模拟和加速蛋白质基因自然重组的进程,即在蛋白质的基因中引进随机突变.因此,蛋白质基因体外随机突变的方法影响着引导蛋白质功能进化的效果.
【机 构】
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广东省暨南大学生命科技学院生物工程系,华南理工大学生物工程系
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引导蛋白质功能进化常用的方法是模拟和加速蛋白质基因自然重组的进程,即在蛋白质的基因中引进随机突变.因此,蛋白质基因体外随机突变的方法影响着引导蛋白质功能进化的效果.本文描述两种简单而有效的基因体外随机突变发生方法.一种是化学诱变法:将蛋白质基因用1.0mol/L硝酸钠在室温下处理1h,然后将突变基因插入质粒,导入大肠杆菌中表达;另一种方法是延伸诱变法:将10个随机氨基酸短肽基因连接到蛋白质基因上,使蛋白质C末端连接随机短肽,通过增大蛋白质分子来达到延伸蛋白质序列空间的目的.来自嗜热脂肪芽孢杆菌的过氧化氢酶I基因用这两种方法进行了随机突变,获得了大量突变体酶基因.通过对突变体酶基因表达产物性质变化的测定,证明这两种基因诱变方法能够有效地诱发基因的随机突变.
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