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目的
探讨华蟾素对肝癌Bel-7402细胞放疗敏感性的影响及其作用机制。
方法分别使用浓度为0.125、0.250、0.500、1.000 μg/mL华蟾素处理肝癌Bel-7402细胞24 h、48 h、72 h，噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖的影响，根据半数抑制浓度(IC50)选择华蟾素浓度及作用时间。用0 μg/mL(对照组)和0.4 μg/mL华蟾素处理肝癌Bel-7402细胞，同时用剂量为0、2、4、6、8 Gy的6 MV X线进行照射，克隆形成实验检测细胞放疗敏感性。用IC50为0.4 μg/mL华蟾素、6 Gy的X线分别单独或联合处理肝癌Bel-7402细胞，48 h后流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率；Western blot检测细胞中p50、p65、Bcl-2、cyclin D1蛋白表达情况。
结果华蟾素能够显著抑制肝癌Bel-7402细胞增殖，随着作用浓度的增加及作用时间的延长，细胞抑制率逐渐升高。华蟾素能够抑制经照射后的肝癌Bel-7402细胞克隆形成能力，细胞存活率显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比，华蟾素组、放疗组及联合组肝癌Bel-7402细胞G0/G1期细胞比例增多，S期细胞减少，细胞凋亡率升高，p50、p65、Bcl-2和cyclin D1蛋白表达降低，差异均有统计学意义(P值均<0.05)；联合组与华蟾素组和放疗组相比，细胞周期、细胞凋亡率及蛋白表达差异均有统计学意义(P值均<0.01)。
结论华蟾素能够增强肝癌Bel-7402细胞的放疗敏感性；其作用机制可能与华蟾素能够通过抑制核因子-κB信号通路及下调Bcl-2和cyclin D1蛋白表达，进而抑制细胞增殖、诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡相关。