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【摘要】 目的 探讨尿标本中视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、微量白蛋白检测在糖尿病肾病早期诊断中的作用。方法 用ELISA法检测尿中视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、免疫比浊法检测尿微量白蛋白，酶偶联法测定尿肌酐。结果 正常对照组中尿RBP/Cr、TRF/Cr的含量分别为(2.12±0.95)mg/mmol,(1.81± 0.52)mg/mmol。在糖尿病无肾病组中，其微量白蛋白的含量与正常对照组相近(P>0.05)，而RBP、TRF的含量与正常对照组相比具有显著差别(P<0.05)。在糖尿病的初期肾病组和临床肾病组，mALB、RBP/Cr、 tRF/C的含量均明显高于正常对照组(P<0.01)。结论 联合检测尿RBP、TRF是诊断糖尿病肾病早期损伤灵敏、可靠的实验室指标。
【关键词】 糖尿病肾病；视黄醇结合蛋白；转铁蛋白;微量白蛋白
糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)为糖尿病(Diabetes mellitus,DM)的一种严重慢性并发症，在糖尿患者的死亡原因中占有较大比例，故早期诊断对糖尿病的防治和预后具有重要意义。在早期肾活检发现组织学改变时，临床上常无症状，尿常规与肾功能检查均可正常。目前肾病的实验室诊断多以尿微量蛋白、肌酐等作为主要诊断指标，这些指标也难以发现肾脏的早期损害。我们联合检测尿中视黄醇结合蛋白(R-binding protein,RBP)、转铁蛋白(Transferrin,TRF)、微量白蛋白（albumin，mALB）等微量蛋白，以期早期发现肾脏损害，进而有助于筛选及检出早期糖尿病肾病。
1 材料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 正常对照组100例，为健康体检人群，男56例，女44例，平均(35.2±10.8)岁。
1.1.2 糖尿病组 按WHO标准诊断：空腹血糖≥7.8 mmol/L或2 h血 糖≥11.1 mmol/L纳入本研究。共100例，其中男52例，女48例，平均(54.2±13.5)岁，以上病例均无其他原因引起的泌尿系统病变及近期服用肾毒性药物史。
根据糖尿病患者尿微量白蛋白排泄率(Urinaryalbumin excretionrate,UAER)将其分为3组。DM1组：UAER＜30 mg/24 h，为无肾病组共30例。DM2组：UAER在30～300 mg/24 h，为初期肾病组共 34例。DM3组：UAER＞300 mg/24 h，为临床肾病组共36例。
1.2 方法 免疫比浊法测定尿微量白蛋白、尿视黄醇结合蛋白、尿转铁蛋白试剂由伊利康生物制品公司提供。同时用Beckman DXC800全自动生化分析仪测量尿肌酐，试剂由美国贝克曼公司提供。结果分别以mALB/Cr、RBP/Cr、TRF/Cr表示，单位为mg/mmol。
1.3 数据统计
实验数据以x±s表示，组间差异采用t检验，部分指标进行相关分析。P<0.05为差异显著。
2 结果
正常对照组与糖尿病各组间尿中mALB、RBP、TRF含量的比较见表1。在正常对照组、糖尿病无肾病组、初期肾病组及临床肾病组中其尿中的mALB、RBP、TRF含量均呈递增趋势。其中在无肾病组(DM1)，其微量白蛋白含量与正常对照组无明显差异(P>0.05)，而RBP、TRF含量均已高于正常对照组(P<0.05)。在初期肾病组(DM2)，尿中mALB、RBP、TRF种微量蛋白的含量与正常对照组相比均有显著升高(P<0.01)，且高于无肾病组(P<0.05)。在临床肾病组(DM3)，尿中上述3种微量蛋白的含量与对照组、无肾病组及初期肾病组相比，均呈显著性升高，其中增加的倍数以mALB为最。
3 讨论
糖尿病患者并发糖尿病肾病的死亡率为未并发肾病者的30倍，一旦发生临床糖尿病肾病，则缺乏有效方法制止其发展，故早期诊断对糖尿病肾病的防治和预后尤为重要。由于早期肾脏病有关症状不多，在少量蛋白尿时也不易被注意，因此大多糖尿病肾病患者总在有明显蛋白尿时方被察觉。认为尿微量白蛋白检测对糖尿病肾病的早期诊断具有价值，在糖尿病患者的尿常规检查中，一旦出现持续阳性，糖尿病肾病的发展将无法逆转［1］。现已有人将视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、微量白蛋白及N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶合称为尿系列蛋白［2］认为他们对糖尿病肾病的早期诊断有重要价值。微量白蛋白尿症是肾病的一个早期信号,患者尿液中持续或间歇存在微量白蛋白,微量白蛋白尿定义为白蛋白的排泄在30 mg/d～300 mg/d,按现行清晨尿的标准为不大于30 mg/Ｌ［3］。24 h尿微量白蛋白总量测定较随机尿微量白蛋白更客观可靠。在糖尿病进程中,初发肾病出现微量白蛋白尿,远早于尿常规的改变和血清尿素氮、肌酐的升高因此对于新诊断的糖尿病宜应常规检测尿微量白蛋白，以早期发现糖尿病肾病。RBP是一种分子量为21.2×103u的低分子量蛋白，经肾小球滤出后，在近端小管几乎完全被重吸收。RBP本身具有较好的稳定性，产量相对恒定，故其在尿中的排泄量可作为肾小管功能受损的一个灵敏指标。实验结果显示，在糖尿病无肾病组中，其尿微量白蛋白含量与对照组相近，而RBP含量已增高，且与对照组存在显著差异。这说明糖尿病患者尿中白蛋白含量尚未增加之前，RBP的含量已明显升高。并可进一步说明，在糖尿病的早期尚未发生肾小球功能障碍时，已存在肾小管的功能损伤［4］。转铁蛋白分子较白蛋白稍大，但所带负电荷较少。负电荷越少，就越易通过肾小球的负电荷屏障碍。因此当糖尿病患者的肾小球滤过膜上出现电荷改变时，转铁蛋白较白蛋白更易从肾小球滤过，尿中转铁蛋白排泄量的增加较白蛋白排泄量的增加出现更早。实验的DM1组中，在mALB与对照组相近的情况下，TRF的含量已呈增高趋势，这说明TRF可作为诊断糖尿病早期肾脏病变的一项敏感指标。总之，联合检测尿中RBP、TRF等微量蛋白的含量可监测糖尿病肾病的发生和发展，为发现早期糖尿病肾病有意义的临床指标。
参考文献
［1］ Parving h H, Andersen A R, Smibt U M, et al. Effect of antihypertensive treatment on kidney function in diabetic nephropathy. br Med J,1987,294(6):1443-1447.
［2］ 陈海英，沈稚舟Ⅱ型糖尿病病人微量白蛋白尿的影响因素中国实验诊断杂志，1998，2(1)：18-21.
［3］ 葛文亮.尿微量白蛋白对糖尿病肾病的早期诊断价值.放射免疫学杂志,2004,17(4):285.
［4］ Hong c Y, Chia K S. Markers of diabetic nephropathy. j Diabetes Complications,1998,12(1)： 43-46.
【关键词】 糖尿病肾病；视黄醇结合蛋白；转铁蛋白;微量白蛋白
糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)为糖尿病(Diabetes mellitus,DM)的一种严重慢性并发症，在糖尿患者的死亡原因中占有较大比例，故早期诊断对糖尿病的防治和预后具有重要意义。在早期肾活检发现组织学改变时，临床上常无症状，尿常规与肾功能检查均可正常。目前肾病的实验室诊断多以尿微量蛋白、肌酐等作为主要诊断指标，这些指标也难以发现肾脏的早期损害。我们联合检测尿中视黄醇结合蛋白(R-binding protein,RBP)、转铁蛋白(Transferrin,TRF)、微量白蛋白（albumin，mALB）等微量蛋白，以期早期发现肾脏损害，进而有助于筛选及检出早期糖尿病肾病。
1 材料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 正常对照组100例，为健康体检人群，男56例，女44例，平均(35.2±10.8)岁。
1.1.2 糖尿病组 按WHO标准诊断：空腹血糖≥7.8 mmol/L或2 h血 糖≥11.1 mmol/L纳入本研究。共100例，其中男52例，女48例，平均(54.2±13.5)岁，以上病例均无其他原因引起的泌尿系统病变及近期服用肾毒性药物史。
根据糖尿病患者尿微量白蛋白排泄率(Urinaryalbumin excretionrate,UAER)将其分为3组。DM1组：UAER＜30 mg/24 h，为无肾病组共30例。DM2组：UAER在30～300 mg/24 h，为初期肾病组共 34例。DM3组：UAER＞300 mg/24 h，为临床肾病组共36例。
1.2 方法 免疫比浊法测定尿微量白蛋白、尿视黄醇结合蛋白、尿转铁蛋白试剂由伊利康生物制品公司提供。同时用Beckman DXC800全自动生化分析仪测量尿肌酐，试剂由美国贝克曼公司提供。结果分别以mALB/Cr、RBP/Cr、TRF/Cr表示，单位为mg/mmol。
1.3 数据统计
实验数据以x±s表示，组间差异采用t检验，部分指标进行相关分析。P<0.05为差异显著。
2 结果
正常对照组与糖尿病各组间尿中mALB、RBP、TRF含量的比较见表1。在正常对照组、糖尿病无肾病组、初期肾病组及临床肾病组中其尿中的mALB、RBP、TRF含量均呈递增趋势。其中在无肾病组(DM1)，其微量白蛋白含量与正常对照组无明显差异(P>0.05)，而RBP、TRF含量均已高于正常对照组(P<0.05)。在初期肾病组(DM2)，尿中mALB、RBP、TRF种微量蛋白的含量与正常对照组相比均有显著升高(P<0.01)，且高于无肾病组(P<0.05)。在临床肾病组(DM3)，尿中上述3种微量蛋白的含量与对照组、无肾病组及初期肾病组相比，均呈显著性升高，其中增加的倍数以mALB为最。
3 讨论
糖尿病患者并发糖尿病肾病的死亡率为未并发肾病者的30倍，一旦发生临床糖尿病肾病，则缺乏有效方法制止其发展，故早期诊断对糖尿病肾病的防治和预后尤为重要。由于早期肾脏病有关症状不多，在少量蛋白尿时也不易被注意，因此大多糖尿病肾病患者总在有明显蛋白尿时方被察觉。认为尿微量白蛋白检测对糖尿病肾病的早期诊断具有价值，在糖尿病患者的尿常规检查中，一旦出现持续阳性，糖尿病肾病的发展将无法逆转［1］。现已有人将视黄醇结合蛋白、转铁蛋白、微量白蛋白及N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶合称为尿系列蛋白［2］认为他们对糖尿病肾病的早期诊断有重要价值。微量白蛋白尿症是肾病的一个早期信号,患者尿液中持续或间歇存在微量白蛋白,微量白蛋白尿定义为白蛋白的排泄在30 mg/d～300 mg/d,按现行清晨尿的标准为不大于30 mg/Ｌ［3］。24 h尿微量白蛋白总量测定较随机尿微量白蛋白更客观可靠。在糖尿病进程中,初发肾病出现微量白蛋白尿,远早于尿常规的改变和血清尿素氮、肌酐的升高因此对于新诊断的糖尿病宜应常规检测尿微量白蛋白，以早期发现糖尿病肾病。RBP是一种分子量为21.2×103u的低分子量蛋白，经肾小球滤出后，在近端小管几乎完全被重吸收。RBP本身具有较好的稳定性，产量相对恒定，故其在尿中的排泄量可作为肾小管功能受损的一个灵敏指标。实验结果显示，在糖尿病无肾病组中，其尿微量白蛋白含量与对照组相近，而RBP含量已增高，且与对照组存在显著差异。这说明糖尿病患者尿中白蛋白含量尚未增加之前，RBP的含量已明显升高。并可进一步说明，在糖尿病的早期尚未发生肾小球功能障碍时，已存在肾小管的功能损伤［4］。转铁蛋白分子较白蛋白稍大，但所带负电荷较少。负电荷越少，就越易通过肾小球的负电荷屏障碍。因此当糖尿病患者的肾小球滤过膜上出现电荷改变时，转铁蛋白较白蛋白更易从肾小球滤过，尿中转铁蛋白排泄量的增加较白蛋白排泄量的增加出现更早。实验的DM1组中，在mALB与对照组相近的情况下，TRF的含量已呈增高趋势，这说明TRF可作为诊断糖尿病早期肾脏病变的一项敏感指标。总之，联合检测尿中RBP、TRF等微量蛋白的含量可监测糖尿病肾病的发生和发展，为发现早期糖尿病肾病有意义的临床指标。
参考文献
［1］ Parving h H, Andersen A R, Smibt U M, et al. Effect of antihypertensive treatment on kidney function in diabetic nephropathy. br Med J,1987,294(6):1443-1447.
［2］ 陈海英，沈稚舟Ⅱ型糖尿病病人微量白蛋白尿的影响因素中国实验诊断杂志，1998，2(1)：18-21.
［3］ 葛文亮.尿微量白蛋白对糖尿病肾病的早期诊断价值.放射免疫学杂志,2004,17(4):285.
［4］ Hong c Y, Chia K S. Markers of diabetic nephropathy. j Diabetes Complications,1998,12(1)： 43-46.