【摘 要】
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目的建立和评价幽门螺杆菌(H.pylori)感染的2种细胞感染模型,为进一步研究H.pylori感染及其相关机制奠定基础。方法培养人胃癌细胞株MKN45细胞,与H.pylori共孵育6h、12h和24h
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目的建立和评价幽门螺杆菌(H.pylori)感染的2种细胞感染模型,为进一步研究H.pylori感染及其相关机制奠定基础。方法培养人胃癌细胞株MKN45细胞,与H.pylori共孵育6h、12h和24h建立MKN45细胞H.pylori感染模型,台盼蓝染色和乳酸脱氢酶(LDH)法测定感染细胞存活率,荧光显微镜照相和流式细胞仪检测Rhodamine123染色的细胞线粒体膜电位;培养小鼠巨噬细胞株RAW264.7细胞,与H.pylori共孵育6h、12h和24h建立RAW264.7细胞H.pylori感染模型,Griess法检测感染细胞上清液中NO的含量变化,RT-q PCR法检测感染细胞中Tnf-α,Inos和Cox-2基因表达变化。结果在MKN45细胞H.pylori感染模型中,感染12h和24h均可显著降低细胞存活率并降低细胞线粒体膜电位,即H.pylori作用于MKN45细胞12h即产生明显的细胞毒性作用;在RAW264.7细胞H.pylori感染模型中,感染6h、12h和24h均可增加细胞上清液中NO含量和细胞Tnf-α,Inos和Cox-2基因表达,即H.pylori作用于巨噬细胞后可明显增加其促炎因子的表达,并随着时间的延长而加强。结论 H.pylori感染MKN45细胞和RAW264.7巨噬细胞可作为理想的H.pylori感染细胞模型。
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