【摘 要】
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以大肠杆菌O157 rfbE和stx2为待检靶基因，设计两对引物和两条MGB探针，rfbE和stx2探针5’端分别用FAM和VIC基团标记，3’端均用Taqman—MGB标记。建立并优化了检测大肠杆菌O157的
【机 构】
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上海交通大学农业与生物学院,南京农业大学动物医学院,上海市畜牧兽医站
【基金项目】
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上海市科技兴农重点攻关项目(No沪农科攻字(2004)第11-4号);上海市科委项目(NO05dz05012)
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以大肠杆菌O157 rfbE和stx2为待检靶基因，设计两对引物和两条MGB探针，rfbE和stx2探针5’端分别用FAM和VIC基团标记，3’端均用Taqman—MGB标记。建立并优化了检测大肠杆菌O157的二重荧光定量PCR方法，可检测的最低DNA浓度是10拷贝／μL；实验中O157菌株检测结果均为rfbE阳性，而非O157菌株检测结果均为阴性；重复性实验中，批间差异小于80％，批内差异小于70％。实验结果显示此二重荧光定量PCR方法可对分离的可疑大肠杆菌O157菌株进行快速鉴定，同时得知菌株是否携带
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