小鼠酸性哺乳动物壳多糖酶基因的表达及对真菌细胞壁的水解作用

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目的克隆和表达酸性哺乳动物壳多糖酶(AMCase),分析其对红色毛癣菌和白念珠菌细胞壁的水解作用。方法从小鼠胃组织中提取总RNA,逆转录成cDNA,扩增AMCase基因,并构建融合表达载体pET28a(+)-AMCase,表达和纯化AMCase蛋白。测定AMCase与红色毛癣菌和白念珠菌细胞壁制备物作用后的N-乙酰氨基葡萄糖浓度。结果成功克隆了小鼠AMCase基因,表达并纯化得到了 AMCase蛋白,纯化后的AMCase可以水解红色毛癣菌和白念珠菌细胞壁。结论在原核系统中成功表达的AMCase基因具有水解红色毛癣菌和白念珠菌细胞壁的活性,提示该蛋白具有潜在的抗真菌功能。
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