目的建立规格为0.03%的他克莫司软膏体外透皮接收液中药物的HPLC测定方法,研究0.03%他克莫司软膏的体外透皮量。方法采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水-磷酸(700∶300∶1);流速:1.0 mL·min-1;检测波长:215 nm。体外透皮实验采用改良的Franz直立式扩散池,透皮屏障采用实验用离体乳猪皮。将自制软膏与市售软膏的透皮结果进行对比分析,分别在设定的不同时间点取样测定透皮接收液中他克莫司的浓度,计算累积透皮量。结果他克莫司的标准曲线方程为A=16 310.263C+3 629.783(r=0.999 97),线性范围为2.088~20.88μg·mL-1,平均回收率为99.10%。累积透皮量与时间呈良好的线性关系,自制软膏与市售软膏的透皮结果无显著性差异。结论该检测方法操作简便,快速准确,是考察他克莫司软膏体外透皮性能的理想方法。