【摘 要】
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目的:探讨FasL基因转移后造血细胞活性是否到影响,骨髓移植(BMT)后受者骨髓造血功能是否受改变.方法:FasL-cDNA经鉴定后,常规收集BalB/c小鼠和BAC小鼠股骨和胫骨骨髓单个核细
【机 构】
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武汉大学人民医院儿科,华中科技大学附属协和医院血液科
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目的:探讨FasL基因转移后造血细胞活性是否到影响,骨髓移植(BMT)后受者骨髓造血功能是否受改变.方法:FasL-cDNA经鉴定后,常规收集BalB/c小鼠和BAC小鼠股骨和胫骨骨髓单个核细胞(BMMNC),采用脂质体转移法将FasL基因转入BalB/c小鼠BMMNC,然后按1:0.625体外与BAC鼠BMMNC混合培养,6 d后实验组(第3组)尾静脉输注给经致死量照射的BalB/c小鼠,同时设立:第1组(空白对照组即未移植细胞);第2组(未转染基因BalB/c鼠BMMNC+BAC鼠BMMNC);第4组(同基因BMT组).观察移植后受者鼠造血功能及细胞来源,移植物抗宿主病(GVHD)及生存率.结果:BMT后10,20 d,第4组白细胞及血小板计数明显高于第2、3组(P＜0.01);第2、3组间差异不显著(P＞0.05);30 d,各组间均无显著性差异(P＞0.05);第1组小鼠相继于1周内死亡,死亡后取脾观察未见脾结节形成.第2组、第3组存活的11只雌性BalB/c小鼠BMMNC中,Y染色体出现率为(79.35±6.77)%.第2组、第3组、第4组2月生存率分别为30%、80%、100%.第3组生存率明显高于第2组(P＜0.01),与第4组无显著差异(P＞0.05).第3组少数及第2组中大部分鼠移植30 d出现GVHD表现,两组死亡鼠及第2组存活鼠组织因子改变符合Ⅱ-Ⅲ度GVHD病理变化,第3组存活7只鼠中有Ⅰ度GVHD病理变化.结论:转基因自体造血细胞与异基因供体BMMNC混合培养后移植,能使受者获给供体来源的造血重建,并明显降低GVHD发生.
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