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建立了一种硫酸新霉素的HPLC分析方法．以邻苯二甲醛（OPA）为衍生化试剂进行柱前衍生化，334nm作为检测波长，流动相为甲醇水溶液（V甲醇：V水=70：30），标准曲线为Y=1×10^6X＋4．1238×10^4，r=0．9983，平均回收率为99．48％．用该方法测定发酵液中硫酸新霉素的含量取得了满意的结果．