pIRES-scFvCD44-TRAIL对人乳腺癌细胞株抑制作用的研究

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目的探讨CD44单链抗体sc Fv CD44、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)双基因共表达真核载体(p IRES-sc Fv CD44-TRAIL)对人乳腺癌MDA-MB-231细胞株的抑制作用。方法 1细胞实验:采用RT-PCR二步法构建p IRES-sc Fv CD44-TRAIL并转染MDA-MB-231细胞(转染组);设转染p IRES空质粒的空白组及不作任何处理的阴性组。转染24 h后采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,计算细胞凋亡率;行划痕试验比较各组细胞迁移情况,计算划痕愈合率。2移植瘤实验:建立乳腺癌荷瘤裸鼠模型8只并随机分为实验组及对照组。实验组皮下注射p IRES-sc Fv CD44-TRAIL 100μL/只,隔日1次,共5次;对照组注射等量生理盐水。观察两组移植瘤生长情况,计算抑瘤率;采用免疫组化法检测两组瘤组织中Ki67的表达水平。结果 1细胞实验:转染组细胞凋亡率明显高于、划痕愈合率明显低于空白组和阴性组。2移植瘤实验:观察组抑瘤率为79.8%;观察组Ki67的阳性细胞率明显低于对照组,P<0.05。结论 p IRES-sc Fv CD44-TRAIL可抑制人乳腺癌细胞及其移植肿瘤的生长及转移。
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