【摘 要】
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目的分析姜黄素在流式细胞仪器Fl通道荧光(525 nm)的荧光,探索阴性对照设置对DCFH-DA探针检测ROS的影响。方法不同浓度姜黄素(0,5,10和20μmol/L)处理SY-5Y细胞24 h,流式细胞
【机 构】
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吉林大学生命科学学院,吉林医药学院教务处,吉林医药学院检验学院,吉林医药学院检验学院
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目的分析姜黄素在流式细胞仪器Fl通道荧光(525 nm)的荧光,探索阴性对照设置对DCFH-DA探针检测ROS的影响。方法不同浓度姜黄素(0,5,10和20μmol/L)处理SY-5Y细胞24 h,流式细胞术分析Fl通道荧光;收集姜黄素处理细胞并装载探针,两种方式设置阴性对照:以不同浓度姜黄素处理细胞为阴性对照,检测对应实验组ROS(方案A);忽略姜黄素荧光,以不含姜黄素的细胞为对照(方案B)。结果与对照组比较,10μmol/L和20μmol/L姜黄素组荧光显著增强。方案A克服了姜黄素荧光对探针荧光的干扰,检测值显示随姜黄素浓度增加(0,5,10和20μmol/L),细胞内ROS逐渐下降(72.96±0.97,51.87±2.11,42.73±2.22和16.67±3.97),体现其以浓度依赖方式抑制ROS的效应,而方案B(mode B)分析后,10μmol/L和20μmol/L组受姜黄素荧光影响,检测值偏差较大。结论采用含姜黄素的细胞做为阴性对照可克服药物荧光对探针信号的影响,获得准确的ROS检测值。
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