【摘 要】
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目的 测定6代次CTN-1V株病毒糖蛋白基因组序列,并研究其致病力稳定性.方法 RT-PCR方法扩增6代次CTN-1V株病毒糖蛋白基因组序列,分别将产物克隆入pGEM-T载体中,测定并拼接序列,应用DNAStar和Mega4.0软件包中的相应软件对基因组序列进行分析,并与近期我国分离且具有地域代表性的狂犬病病毒街毒株进行基因同源性分析；测定6代次CTN-1V株病毒滴度(LD50/ml)和细胞荧光滴
【机 构】
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100050北京,中国食品药品检定研究院虫媒病毒疫苗室,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室,100050北京,中国食品药品检定研究院虫媒病毒疫苗室,卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点
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目的 测定6代次CTN-1V株病毒糖蛋白基因组序列,并研究其致病力稳定性.方法 RT-PCR方法扩增6代次CTN-1V株病毒糖蛋白基因组序列,分别将产物克隆入pGEM-T载体中,测定并拼接序列,应用DNAStar和Mega4.0软件包中的相应软件对基因组序列进行分析,并与近期我国分离且具有地域代表性的狂犬病病毒街毒株进行基因同源性分析；测定6代次CTN-1V株病毒滴度(LD50/ml)和细胞荧光滴度(FFU/ml),采用FFU/LD50指标来对病毒的毒力进行评价.结果 6代次CTN-1V株病毒序列测定结果表明,仅第1222位的G突变为A,导致408位氨基酸由谷氨酸突变为赖氨酸,而1320位核苷酸由A突变为G,但显示为无义突变；5代次CTN-1V株病毒致病力指标均在1.00～1.07之间；糖蛋白生物信息学分析表明,CTN-1V株病毒与我国近期分离的街毒株均具有较高同源性.结论 CTN-1V株病毒糖蛋白传代稳定,且与我国近期分离的街毒株高度同源,各代次CTN-1V株病毒糖蛋白基因组序列的测定及致病力研究,为完善该毒株的质量控制提供数据支持。
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