不对称荧光PCR扩增白念珠菌ITS-2基因单链DNA实验

来源 :检验医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hongjiansu

【摘要】

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目的比较在限制性引物不同稀释比例条件下，不对称荧光聚合酶链反应（PCR）扩增白念珠菌5.8SrDNA与28SrDNA间内转录间区2（ITS-2）基因的单链DNA（ssDNA）的实际效果，探讨其体系优化方法。方

【作者】

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王敬华虞培娟葛平徐蓉陈蓉刘学杰王华梁

【机构】

：

上海市临床检验中心临床微生物室,苏州大学附属第二医院检验科

【出处】

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检验医学

【发表日期】

：

2017年3期

【关键词】

：

不对称荧光聚合酶链反应白念珠菌 ITS-2基因单链DNA Asymmetric fluorescence-polymerase chain reaction

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目的比较在限制性引物不同稀释比例条件下，不对称荧光聚合酶链反应（PCR）扩增白念珠菌5.8SrDNA与28SrDNA间内转录间区2（ITS-2）基因的单链DNA（ssDNA）的实际效果，探讨其体系优化方法。方法以常规PCR为对照，将20μmol/L的正向引物（P1）按照一定比例预稀释后，分别与20μmol/L的荧光标记反向引物（P2'）组成含不同P1水平的引物对，采用不对称荧光PCR扩增真菌ITS-2，并对PCR产物进行电泳和测序分析，比较各实验组扩增ssDNA的效果。结果不对称荧光PCR成功扩增

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