【摘 要】
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目的:构建能同时干扰VEGF和p53基因表达的RNAi腺病毒干扰载体,观察其对肿瘤细胞VEGF和p53的干扰作用.方法:先分别构建能干扰p53和VEGF的质粒载体,依次将构建干扰载体的干扰序
【机 构】
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山东大学齐鲁医院消化科,山东大学医学院病理教研室,山东省肿瘤医院基础研究中心,山东大学医学院分子生物学教研室
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目的:构建能同时干扰VEGF和p53基因表达的RNAi腺病毒干扰载体,观察其对肿瘤细胞VEGF和p53的干扰作用.方法:先分别构建能干扰p53和VEGF的质粒载体,依次将构建干扰载体的干扰序列和H1启动子序列切下并连接到pAdTrack上,构建成pAdTrack/VEGF/p53,将构建的质粒转染含有pAdEasy-1的BJ5183工程菌中,回收并酶切鉴定重组腺病毒载体,将阳性腺病毒载体感染293细胞并收集病毒,采用荧光定量PCR检测腺病毒干扰载体同时降低VEGF和p53表达的作用.结果:经过酶切鉴定,p
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