【摘 要】
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目的 探讨富硒黄芪皂苷对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的大鼠退变软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白、磷酯酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3(microtubulerassociated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3
【机 构】
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730000 兰州, 甘肃中医药大学中医临床学院;730000 兰州, 甘肃中医药大学教学实验实训中心;730000 兰州, 甘肃中医药大学公共卫生学院;730000 兰州, 甘肃中医药大学第一临床医
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目的 探讨富硒黄芪皂苷对白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导的大鼠退变软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白、磷酯酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、Beclin-1和微管相关蛋白1轻链3(microtubulerassociated protein 1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)mRNA表达的影响.方法 体外退变软骨细胞模型的建立用IL-1β(10 ng/mL)诱导,模型组和富硒黄芪皂苷治疗组分别给予DEME培养基和富硒黄芪皂苷干预(25～300 mmol/L),另外将第3代培养48 h的软骨细胞作为正常对照组,给予DEME培养基干预24、48、72 h.应用噻唑蓝(MTT)法检测各组软骨细胞的增殖能力,运用免疫组化法观察各组软骨细胞Ⅱ型胶原蛋白的表达变化,运用RT-PCR法检测各组软骨细胞PI3K、Akt、mTOR、Beclin-1和LC3-Ⅱ的基因表达变化.结果 正常对照组、 模型组和100 mmol/L富硒黄芪皂苷治疗组的Ⅱ型胶原蛋白表达水平分别为2347.85±179.23,1547.27±261.79和3575.46±287.56;3组的PI3K基因表达水平分别为1.00±0.03,2.75±0.02和1.14±0.01;3组的Akt基因表达水平分别为1.00±0.04,1.83±0.07和1.13±0.04;3组的mTOR基因表达水平分别为1.00±0.02,2.12±0.04和1.52±0.03;3组的Beclin-1基因表达水平分别为1.02±0.02,0.61±0.03和0.90±0.02;3组的LC3-Ⅱ基因表达水平分别为0.97±0.02,1.24±0.01和1.05±0.04.与正常对照组比较,模型组退变软骨细胞的增殖能力在24、48、72 h均减弱,且其Ⅱ型胶原蛋白的表达和Beclin-1基因表达在48 h下降,而模型组退变软骨细胞PI3K、Akt和mTOR基因表达在48 h则增强(P<0.05).与模型组比较,富硒黄芪治疗组退变软骨细胞增殖能力在24、48、72 h均增强,但以48 h的100 mmol/L富硒黄芪皂苷的差异最显著,同时其Ⅱ型胶原蛋白的表达和Beclin-1基因表达也升高,而100 mmol/L富硒黄芪则使PI3K、Akt和mTOR基因表达降低(P<0.05).结论 富硒黄芪皂苷延缓及控制骨关节炎进展的可能机制与调控mTOR信号通路有关.
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