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以荷斯坦牛胚胎和小鼠胚胎为材料,研究了犊牛血清、饲养层、培养液、添加物和消化液对牛胚胎干细胞和小鼠胚胎干细胞克隆效率的影响。结果表明,在24h内上鼠胚胎贴壁率达86%以上的犊牛血清可用于小鼠和牛胚胎于细胞的分离;在ES细胞分离与克隆中,以15%-20%犊牛血清为宜,在DMEM(L)培养基中添加0.1μmol/L Na2SeO3+0.1mmol/Lβ-疏基乙醇+10μg/L IGF+1000IU/mL LIF,能显著提高牛ES细胞分离与克隆效率;在TCM199、DMEM(高糖)和DMEM(低糖)3种培养基